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檢測動物身上的油脂
發布時間:2021-03-30   點擊次數:30次

檢測動物身上的油脂

 1、原理。

油脂受到光、熱、空氣中氧的作用,發生酸敗反應,分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產物的一種,它能與TBA(硫代巴比妥酸)作用生成粉紅色化合物,在532nm波長處有吸收高峰,利用此性質即能測出丙二醛含量,從而推導出油脂酸敗的程度。 

2、試劑。

BA水溶液:準確稱取TBA0.288g溶于水中,并稀釋至100ml(如TBA不易溶解,可加熱至全溶澄清,然后稀釋至100ml),相當于0.02mol/L;

 三氯-乙酸混合液:準確稱取三氯-乙酸(分析純)7.5g及0.1gEDTA,用水溶解,稀釋至100ml;

丙二醛標準溶液:稱取0.315g1,1,3,3-四乙氧基丙烷,溶解后稀釋至1000ml,此溶液每ml相當于丙二醛100μg,置于冰箱內保存。準確吸取10ml,稀釋至100ml,此溶液每毫升相當于丙二醛10μg,備用。 

3、操作步驟 。

(1)標準曲線的繪制

 準確吸取每相當于丙二醛10μg的標準溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中,加水至總體積5.00ml,加入5.00ml TBA溶液,然后按樣品測定步驟進行,測得光密度繪制標準曲線。

(2)樣品測定:

稱取融化均勻的油脂樣品10g(準確至0.0002g),置于100ml有蓋三角瓶內,加入50.00ml三氯乙-酸混合液,振搖半小時(保持油脂融溶狀態,如冷結即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續振搖)用雙層濾紙過濾,除去油脂。濾液重復用雙層濾紙過濾一次。 

移取上述濾液5.00ml置于25ml比色管內,加入5.00ml TBA溶液,混勻,加塞,置于90℃水浴內保溫40min,取出,搖勻,靜置,冷卻1h ,于532nm波長比色,對照標準曲線得到微克數(同時作空白試驗)

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