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抗酸染色液染色程度可通過時間或溫度適當調整
發布時間:2021-03-19   點擊次數:30次

抗酸染色液染色程度可通過時間或溫度適當調整

 

抗酸染色用于細菌標本涂片或菌落涂片的染色。常用于對分枝桿菌屬進行初步鑒別。普通細菌染色比較容易著色,而分支桿菌細胞壁含脂質較多,染色比較困難,必須加熱才能被石炭酸復紅著色。分枝桿菌菌體著色后,能抵抗鹽酸酒精等酸性脫色劑的脫色,而其他細菌和細胞等均被脫色。當再用堿性美藍復染后,分支桿菌仍為紅色,其他細菌與背景呈藍色。

 

1、 做一適當厚度的涂片,干燥后火焰固定。
2、 滴加抗酸染色液 A 于玻片上,覆蓋住樣本,在酒精燈上加熱,切勿沸騰,出現蒸汽即暫時移開,必要時可續加染色劑以免干涸。加熱 3-5 分鐘。
3、 移開火,靜置 5 分鐘,待標本冷卻后以自來水沖洗。
4、 用抗酸染色液 B 脫色(大約 1 分鐘)至無紅色染液脫出為止。完全脫色可避免產生假陽性結果。
5、 自來水緩慢沖洗后,滴加抗酸染色液 C 復染約 30 秒,水洗。
6、 待干后油鏡觀察

 

注意事項:
1. 染色程度可通過改變染色時間或染色溫度做適當調整。
2. 每次試劑用完后,請迅速蓋好,以免揮發。
3. 本產品有一定的刺激性和腐蝕性,使用時請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

在我們做生物醫學實驗或者某些物理化學實驗時,為了更好地觀察到實驗效果,通常會選用合理的染色劑,在選擇適當的染色劑后,我們就能夠很好地觀察到預期的實驗現象或結果。染色劑依據來源可分為天然染色劑和人工合成染色劑,各種不同的實驗選擇不同的染色劑,同一種染色劑也可以用不同的配方進行調配制成。

天然染料
1、蘇木精 蘇木精是從南美的蘇木(熱帶豆科植物)干枝中用乙醚浸制出來的一種色素,是常用的染料之一。蘇木精不能直接染色,必須暴露在通氣的地方,使他變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)后才能使用,這叫做“成熟”。蘇木精的“成熟”過程需時較長,配置后時間愈久,染色力愈強。被染材料必須經金屬鹽作媒劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁銨、鉀明礬和鐵明礬等。
蘇木精是淡黃色到銹紫色的結晶體,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染細胞核的優良材料,他能把細胞中不同的結構分化出各種不同的顏色。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異,用酸性溶液(如鹽酸—酒精)分化后呈紅色,水洗后仍恢復青藍色,用堿性溶液(如氨水)分化后呈藍色,水洗后呈藍黑色。
2、洋紅 洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產的雌性胭脂蟲干燥后,磨成粉末,提取出蟲紅,再用明礬處理,除去其中雜質,就制成洋紅。單純的洋紅不能染色,要經酸性或堿性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸,堿性溶液有氨水、硼砂等。
洋紅使細胞核的優良染料,染色的標本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜,尤其適宜于小型材料的整體染色。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年。洋紅溶液出現渾濁時要過濾后再用。

 

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