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組織甘油檢測試劑盒

組織甘油檢測試劑盒

產品時間:2019-01-16

簡要描述:

組織甘油檢測試劑盒;甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,也是機體重要的供能物質。高甘油三酯和高膽固醇血癥是臨床常見的高脂血癥,與許多疾病相關。與血漿甘油三酯測定相比,實體組織和細胞的甘油三酯測定并非易事。

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組織甘油檢測試劑盒

 

描述:甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,也是機體重要的供能物質。高甘油三酯和高膽固醇血癥是臨床常見的高脂血癥,與許多疾病相關。與血漿甘油三酯測定相比,實體組織和細胞的甘油三酯測定并非易事。本試劑盒避免了有毒的lv仿甲醇提取、繁雜的氮氣吹干和脂質復溶等步驟,采用高效能試劑進行組織細胞裂解和甘油三酯抽提,而且優化了GPO Trinder酶學反應組分和操作步驟。簡單易行、靈敏度高檢測范圍為 20-2000µmol/L??捎糜诰_測量動植物組織細胞、固態食品材料、高濃度油料樣品中的甘油三酯含量。

原理

(1)脂肪酶分解血清中的甘油三酯為甘油;

(2)甘油激酶將甘油磷酸化為3-磷酸甘油;

(3)3-磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化產生過氧化氫;在過氧化物酶作用下生色底物轉化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。

 

適用范圍:適用于動物實體組織、培養細胞、油料植物組織、固態食品組織、高濃度油料樣品中甘油三酯含量的測定。

 

操作步驟:

一 組織細胞裂解:

   在裂解前,組織或者細胞用PBS洗滌兩次以去除甘油
1. 原代脂肪細胞:200g,5分鐘離心收集細胞。建議每100 µl壓積(Packed Cell Volume)脂肪細胞加入1ml裂解液,震蕩裂解,而后室溫靜置10分鐘。
2. 分化脂肪細胞或非脂肪細胞:可先用胰酶消化、離心收集細胞而后進行裂解,也可直接在培養皿內進行裂解。通常情況下,可按比例每1x106 個細胞加入0.1ml裂解液,混勻后室溫靜置10分鐘。
3. 動物組織:離心管精確稱重,加入組織塊后再稱重,二者相減(即減量稱重法)計算組織重量(約50mg)。強烈建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質含量變異而產生的誤差。強烈建議裂解液用量在1ml左右,保證有效的勻漿裂解與脂質提取。用電動高速勻漿器或手動玻璃勻漿器破碎組織。(不推薦超聲方法,因其不能完全和均勻破碎。應根據預實驗調整初始的組織細胞加入量),勻漿后靜置10分鐘。
4. 植物油料種子、食品、含高油量樣品:用減量稱重法對樣品進行精確稱重,建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質含量變異而產生的誤差。加入裂解液后可用研缽對樣品進行研磨,而后將研磨液轉移到新的離心管中,室溫靜置10分鐘。

 

組織甘油檢測試劑盒

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