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胰島素(INS) 放免試劑盒

胰島素(INS) 放免試劑盒

產品時間:2019-06-17

簡要描述:

胰島素(INS) 放免試劑盒
 
胰島素是由胰臟內的胰島β細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。

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胰島素(INS) 放免試劑盒

 

胰島素是由胰臟內的胰島β細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。

 

[使用目的] 用于定量測定人血清或血漿中胰島素(Ins)的濃度。

[用途] 胰島素的測定主要用于對糖尿病的分型,即通過胰島素釋放實驗,區分糖尿病的類型。 另外對于研究胰島素β細胞的分泌功能、胰島素瘤的分析、探討冠心病機理等也有一定的意 義。

[試驗原理] 本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含胰島素(Ins)的樣 品和 125I 標記的胰島素(Ins)與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二抗及 PEG,使免疫復合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數。通過標準曲線得到樣本中胰島素(Ins) 的濃度。

[使用前準備] 試驗前,恢復樣本至室溫,小心搖勻血清樣本。 [實驗方法] 1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,凍干品按操作要求進行溶解,平衡至少 30 分鐘 以上才可進行操作; 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復; 3、 每個 NSB 管加入 200µl 溫育液,每個標準品“0”管 加入 100µl 溫育液; 4、 取每個濃度的標準品(A~F)、質控血清和樣本 100µl 加入相應編號的試管中; 5、 每管均各加入 100µl 標記物工作液; 6、 每管均各加入 100µl 抗體工作液,充分混勻; 7、 37℃溫育 2 小時; 8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻; 9、 室溫放置 15 分鐘后,離心 3500 轉/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液; 10、 用 γ-計數器測定各管計數 CPM. 推薦檢測時間: 1 分鐘; 11、 從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。

[實驗過程中應注意] 1、 γ-計數器本底計數應≤100CPM/分,效率應≥75%; 2、 加入放射性標記物時,應做好防護、小心謹慎,以避免造成放射性污染; 3、 如果某一個樣本的測定值高于ZUI高濃度的標準品濃度,用零標準品以 1:2 或 1: 4 的比例稀釋樣本后重新測試,測試結果乘以相應的稀釋倍數。

[質量控制] 每次實驗操作應至少采用兩個濃度的質控血清進行質量控制,以確保每次實驗測定結果 的可靠性。 100 100 1、 質控血清的平均值應在允許范圍內; 2、 曲線方程應采用ZUI佳擬合方式; 3、 重復樣本的測定結果相差在 15%以內。 如不能同時滿足以上條件,則此次試驗結果無效,全部試驗需重新進行。

[測定結果的計算] 1、 計算標準品(A~F)、質控品和樣品與標準品 0 的比值(B/B0); 2、 劑量-反應曲線按“對數劑量-結合率對數”(Log(dose-Log(B/Bmax))數學模型 或四參數數學模型擬合,通過每個標準品的 B/B0和其濃度建立標準曲線; 3、 從標準曲線上查出樣本的濃度值,B/B0不在標準曲線之內的樣本及其濃度

[實驗的局限性] 1、 本品僅供體外診斷使用,只能用于人血清或血漿樣本的測定而不能用于其他體 液樣本; 2、 通過其它方法得到的 T 值與本品測定結果不具有直接的可比性;

 

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