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C肽放免試劑盒

C肽放免試劑盒

產品時間:2019-06-17

簡要描述:

C肽放免試劑盒
C肽(C-Peptide)又稱連接肽,由胰島β細胞分泌,它與胰島素有一個共同的前體胰島素原。

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C肽(C-Peptide)又稱連接肽,由胰島β細胞分泌,它與胰島素有一個共同的前體胰島素原。

[用途] 1) 指導胰島素治療,對于胰島素治療的病人,C 肽測定可以確定是否繼續使用胰島素治 療,還是用口服降糖藥或飲食治療。C 肽的測定值對糖尿病的治療具有重要意義。 2) 對低血糖綜合癥的診斷。 3) 對胰島移植和胰腺移植的病人,C 肽測定可以了解移植是否存活和 B 細胞的功能。 4) 同時測定 C 肽和胰島素可了解肝病的變化,如肝硬化時,外周血 C 肽/胰島素的比值下 降。 5) 對胰島或胰腺腫瘤治療后復發和功能的診斷。

[試驗原理] 本藥盒采用競爭放射免疫分析法,通過二抗沉淀抗原-抗體免疫復合物來測定血清中 C 肽的含量,待測血清、標準品中的 C 肽和 125I-C–P 與有限量的抗體競爭結合。125I-C–P 一 部分與抗體結合為復合物,另一部分游離。加入分離試劑,離心使復合物部分沉淀,與游離 部分分離,棄去上清液,測定沉淀物的放射性計數。待測血清和標準中的 C 肽含量與與復合 物的放射性強度呈負相關,用一系列不同濃度的 C 肽作標準,可獲得標準曲線,從標準曲線 上可查出血清中 C 肽的含量。

[注意事項] 1) 收到分析試劑盒后,盡快存放在 2 – 8℃。 2) 由于 C 肽在溶液狀態下極不穩定,所以先溶解標記物、抗體,待一切準備工作完畢后, 后溶解標準品。如果分析試劑盒一次用不完,要做若干次,那么把標準品溶解后盡快 分裝成若干份,并立即存放在–20℃保存,避免反復凍融。C 肽標記物的分裝、使用、 保存同標準品程序,避免反復凍融。 3) 在加分離試劑前,將分離試劑搖勻。 4) 分析試管放在 4℃溫育時,好套上塑料袋,避免蒸發,保持一定的反應體積。

[實驗方法] 1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,凍干品按操作要求進行溶解,平衡至少 30 分鐘 以上才可進行操作; 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復; 3、 每個 NSB 管加入 200µl 溫育液,每個標準品“0”管 加入 100µl 溫育液; 4、 取每個濃度的標準品(A~F)、質控血清和樣本 100µl 加入相應編號的試管中; 5、 每管均各加入 100µl 標記物工作液; 6、 除 T、NSB 管外,每管均各加入 100µl 抗體工作液,充分混勻; 7、 4℃溫育 24 小時; 8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻; 9、 室溫放置 15 分鐘后,離心 3500 轉/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液; 10、 用 γ-計數器測定每管 1 分鐘的放射性強度計數; 11、 從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。

[實驗過程中應注意] 1、 γ-計數器本底計數應≤100CPM/分,效率應≥75%; 2、 加入放射性標記物時,應做好防護、小心謹慎,以避免造成放射性污染; 3、 如果某一個樣本的測定值高于ZUI高濃度的標準品濃度,用零標準品以 1:2 或 1: 4 的比例稀釋樣本后重新測試,測試結果乘以相應的稀釋倍數。

[質量控制] 每次實驗操作應至少采用兩個濃度的質控血清進行質量控制,以確保每次實驗測定結果 的可靠性。 1、 質控血清的平均值應在允許范圍內; 2、 曲線方程應采用佳擬合方式; 3、 重復樣本的測定結果相差在 15%以內。 如不能同時滿足以上條件,則此次試驗結果無效,全部試驗需重新進行。

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